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液相色谱仪有哪些常见故障?如何解决?

点击次数:3967  更新时间:2016-03-18

液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。液相色谱仪在生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等领域均有广泛应用。液相色谱仪在使用中有哪些常见故障?如何处理?

1、柱压高。

原因:缓冲液盐分沉积于柱内;或者是样品污染沉积。

措施:如果是缓冲液盐分沉积于柱内,则用40~50℃的纯水低速正向冲洗柱子,逐渐提高流速冲洗,柱压大幅度下降后再用常温纯水清洗,zui后用纯甲醇冲洗柱子30分钟。

如果是样品污染沉积导致,则用纯水反向冲洗柱子,再用甲醇冲洗,随后用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子,再用甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,zui后用甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟。

2、气泡溢出。

原因:主要是由于过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,内部霉菌繁殖形成菌团阻塞了过滤器导致。

措施:将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,利用超声清洗既分钟。或者将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,再用纯水清洗,打开purge键清洗脱气,直到没有气泡冒出。打开泄压阀,打开泵,纯水冲洗过滤器1小时左右。

3、无压力指示,也无液体流过。

原因:泵密封垫圈磨损;或大量气泡进入泵体。

措施:更换密封垫圈,或用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。

4、压力波动大,流量不稳定。

原因:系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物。

措施:观察流动相的量,动相要充分脱气。如果是单向阀和阀座不能密封,则拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。

5、出峰不佳,峰分叉。

原因:色谱柱被污染,或者柱头填料塌陷。

措施:色谱柱被污染则需清洗色谱柱。如果柱头填料塌陷或硬结,则去除硬结部分,冲新装入新填料。反复滴甲醇,压紧不锈钢杆,直至填满。柱头用甲醇冲洗干净。

6、峰面积重复性不佳。

原因:进样阀漏液;或加样针不到位,或者是液量不足。

措施:更换进样阀垫圈。如果是加样针不到位,则将加样针插到底,液量不足则注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态。避免注射过浓的样品溶液。

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